大鼠原代胰腺导管上皮细胞（RPDEC）应用案例与技术方案

产品概述

大鼠原代胰腺导管上皮细胞（Rat Primary Pancreatic Ductal Epithelial Cells, RPDEC）是胰腺导管系统的核心功能细胞，参与胰液分泌、导管稳态维持及胰腺疾病（如胰腺炎、胰腺癌）的发生发展。安元生物科技（南京）有限公司提供的RPDEC，采用酶消化 - 差速贴壁法分离自SPF级SD大鼠胰腺组织，经多重质量验证，具备高活性（P0代活力≥92%）、高纯度（CK19阳性率＞95%）、低衰老标记（p16INK4a表达＜5%）等特性，支持长期传代（≥10代）及多场景实验需求。

技术方案：标准化制备与质量控制

安元生物RPDEC的生产遵循ISO 9001质量体系，核心技术流程及质控标准如下：

原代分离技术

组织处理：采用胶原酶IV（1 mg/mL）联合DNA酶I（0.1 mg/mL）梯度消化，精准分离导管上皮细胞与间质细胞。

纯化策略：通过差速贴壁（2小时预贴壁）结合免疫磁珠分选（抗CK19微球），去除成纤维细胞、免疫细胞等杂质。

质量控制

指标	标准/方法	结果示例
细胞活力	台盼蓝染色法	P0代≥92%，P3代≥85%
表型纯度	免疫荧光（CK19+/SOX9+）	阳性率＞95%
功能活性	碱性磷酸酶（ALP）活性检测	P0代ALP活性≥12 U/mg蛋白
微生物安全性	支原体/细菌/真菌检测	均为阴性

实验案例与应用场景

案例1：胰腺导管上皮细胞在慢性胰腺炎模型中的损伤机制研究

背景：慢性胰腺炎（CP）以导管上皮损伤、纤维化为特征，RPDEC是模拟疾病进展的关键模型。

实验设计：使用安元RPDEC（P1代）建立TNF - α（10 ng/mL）诱导的损伤模型，检测细胞凋亡（Annexin V/PI）、炎症因子（IL - 6、TNF - α）及纤维化标记（α - SMA、COL1A1）表达。

关键数据： - TNF - α刺激24小时后，RPDEC凋亡率从5%升至32%（*p＜0.01）； - IL - 6分泌量较对照组增加4.2倍（ELISA检测）； - α - SMA蛋白表达上调2.8倍（Western Blot），验证导管上皮 - 肌成纤维细胞转化（EMT）过程。

结论：安元RPDEC可稳定模拟CP中导管上皮损伤及纤维化启动，为抗纤维化药物筛选提供可靠模型（数据支持发表于《Pancreatology》）。

案例2：胰腺癌微环境中导管上皮细胞与癌细胞的交互作用

背景：胰腺导管腺癌（PDAC）中，导管上皮细胞异常分泌因子促进癌细胞侵袭。

实验设计：将安元RPDEC（P2代）与PDAC细胞系（PANC - 1）进行Transwell共培养，检测癌细胞迁移（划痕实验）、EMT标记（Snail、Vimentin）及生长因子（HGF、EGF）分泌。

关键数据： - 共培养48小时后，PANC - 1迁移率较单独培养组提高67%（*p＜0.001）； - RPDEC分泌HGF水平达850 pg/mL（ELISA），显著高于正常对照（320 pg/mL）； - Snail蛋白在PANC - 1中表达上调3.1倍，证实RPDEC通过旁分泌HGF诱导癌细胞EMT。

结论：安元RPDEC可真实反映PDAC微环境中导管上皮细胞的促癌功能，助力靶向导管上皮 - 癌细胞互作的药物开发（数据支持发表于《Cancer Biology & Therapy》）。

案例3：药物毒性评估——新型胰酶抑制剂的导管上皮保护作用

背景：研发阶段需验证候选药物对正常导管上皮的安全性及保护效应。

实验设计：使用安元RPDEC（P1代）进行吉西他滨（10 μM）毒性实验，同时加入候选药物A（1 μM）共孵育，检测细胞活力（CCK - 8）、氧化应激（MDA水平）及凋亡蛋白（Bax/Bcl - 2）。

关键数据： - 吉西他滨单药组细胞活力降至41%，加入药物A后回升至78%（*p＜0.05）； - MDA水平从8.2 nmol/mg降至4.5 nmol/mg，Bax/Bcl - 2比值从2.1降至1.2，显示药物A通过抗氧化及抗凋亡机制保护RPDEC。

结论：安元RPDEC可用于评估药物对正常胰腺导管的毒性，为临床前安全性评价提供金标准模型（数据支持企业内部研发报告）。

产品应用领域

安元RPDEC广泛应用于：

基础研究：胰腺导管发育、损伤修复、EMT机制；

药物开发：抗胰腺炎/胰腺癌药物筛选、毒性评估；

再生医学：导管上皮细胞体外扩增、类器官构建。

参考文献

[1] 标题：TNF - α - induced apoptosis and fibrosis in primary rat pancreatic ductal epithelial cells: Implications for chronic pancreatitis pathogenesis 期刊：Pancreatology. 2021;21(3):582 - 591. 作者：Li X, et al. 简介：利用原代大鼠导管上皮细胞验证TNF - α通过激活NF - κB通路诱导凋亡及EMT，为本产品模拟CP损伤提供机制支持。

[2] 标题：Primary pancreatic ductal epithelial cells as a tool to study cancer - stroma crosstalk in pancreatic adenocarcinoma 期刊：Cancer Biology & Therapy. 2022;23(8):789 - 798. 作者：Wang Y, et al. 简介：通过共培养实验证实原代导管上皮细胞分泌HGF促进PDAC细胞侵袭，为本产品用于微环境研究提供方法学参考。

安元生物科技（南京）有限公司